เปรียบเทียบการตรวจวิธี Carba NP มาตรฐานกับวิธี Carba NP ประยุกต์ ในการตรวจหา การสร้างเอนไซม์ carbapenemase ของเชื้อแบคทีเรียตระกูล Enterobacteriaceae
คำสำคัญ:
CRE, blaIMP-14a, blaKPC, blaNDM, blaOXA48-like, Carba NP, เชื้อดื้อยา carbapenemบทคัดย่อ
Carbapenemase เป็นเอนไซค์ที่พบในแบคทีเรียหลายชนิดโดยเฉพาะแบคทีเรียกลุ่ม Enterobacteriacae ทำให้เชื้อดื้อต่อยากลุ่ม Carbapenem กลไกการดื้อยาของเชื้อจะถูกควบคุมโดย gene หลายชนิดเช่น blaIMP-14a, blaKPC, blaNDM, blaOXA48-like เป็นต้น เรียกเชื้อดื้อยากลุ่มนี้ว่า Carbapenemase-resistant enterobacteriaceae (CRE) อาจพบเชื้อมี gene ดื้อยาชนิดเดียวหรือหลายชนิดในตัวเดียวกันได้ การตรวจหาgene นี้โรงพยาบาลในส่วนภูมิภาคทั่วประเทศส่วนใหญ่จะไม่มีเครื่องมือหรือขีดความสามารถในการตรวจ ต้องส่งตรวจต่อที่โรงพยาบาลระดับมหาวิทยาลัย หรือกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ ซึ่งต้องใช้เวลานานในการจะทราบผลการตรวจยืนยัน วิธีการตรวจการดื้อยาดังกล่าวที่โรงพยาบาลในส่วนภูมิภาคจะ
สามารถทำการตรวจได้ในเบื้องต้นนอกจากการทำผลความไวต่อยาปฏิชีวนะในกลุ่ม Carbapenem เช่น Imipenem Ertapenem Meropenem การตรวจหาการดื้อยาของเชื้อในกลุ่ม Enterobacteriacae มีหลายวิธี เช่น Modified Hodge Test, The Imipenem-EDTA combination disk ซึ่งการอ่านผลค่อนข้างยากและมีปัญหาที่ไม่สามารถตรวจพบได้ครอบคลุมในทุก gene ที่ดื้อยา CLSI แนะนำให้ใช้วิธี Carba NP ในการตรวจ ซึ่งจะสามารถตรวจพบเชื้อที่มีgeneดื้อยาได้มากกว่าสองวิธีแรก การศึกษาในครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์ตรวจหาเชื้อดื้อยาโดยวิธี Carba NP วิธีมาตรฐานพบว่ามีขั้นตอนการทำงานที่น่าจะลดเวลาลงได้และการใช้ Imipenem/cilastatin ที่ใช้เป็นยาในการรักษาผ้ปู ่วยที่มีอย่แู ล้วในโรงพยาบาล แทนการใช้ Imipenem monohydrate ที่มีราคาแพงกว่ามาก โดยศึกษาเปรียบเทียบวิธีการ ปริมาณสารที่ใช้ในการทดลอง
การศึกษาพบว่าวิธีการตรวจ Carba NPประยุกต์ สามารถลดระยะเวลาการตรวจลงได้ จาก 35-40 นาที เป็นใช้เวลาในการตรวจประมาณ 2-3 นาที และสาร imipenem/cilastatin ที่ใช้ปริมาณ 6 มิลิกรัมเป็นปริมาณน้อยสุดที่สามารถตรวจพบเชื้อดื้อยา Carbapenem ได้เช่นเดียวกับวิธี Carba NPมาตรฐาน พบว่าทั้งสองวิธีมีความสัมพันธ์กันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ แต่ความเข้มของสีที่ตรวจได้จากวิธี Carba NP ประยุกต์จะสีสดน้อยกว่า ส่วนสาร Cilastatin ที่มีผสมในยา Imipenem เพื่อป้องกันยาถูกทำลายโดยเอนไซค์ Dehydropeptidase เท่านั้นไม่รบกวนปฏิกิริยาในการทดสอบวิธี Carba NP แต่อย่างใด หากมีข้อสงสัยหรือไม่แน่ใจในผลการตรวจ ควรตรวจยืนยันโดยวิธีการตรวจหาgene ดื้อยาต่อไปทั้งวิธีมาตรฐานและวิธีประยุกต์
ดังนั้นวิธี Carba NP ประยุกต์จะเป็นทางเลือกให้กับโรงพยาบาลในส่วนภูมิภาคที่พบเชื้อสงสัยดื้อยากลุ่ม Carbapenem และต้องการตรวจสนับสนุนการดื้อยาในเบื้องต้น สำหรับแพทย์ผู้รักษา พยาบาลควบคุมโรคเพื่อควบคุมการแพร่กระจายของเชื้อได้รวดเร็วและลดต้นทุนทางการแพทย์
เอกสารอ้างอิง
2. Nordman P, Naas T, and Poirel L. Global Spread of Carbapenemase-producing Entero-bacteriaceae: Class a Carbapenemases. Emerging Infectious
Diseases 2011;17:1791-8.
3. Chen LF. Division of Infectious Diseases and International Health, Duke University, Durham, North Carolina. Klebseilla pneumoniae Carbapenemase:
Extended-Spectrum beta-Lactamase Continues to Go Global. Medscape Infectious Disease @ 2009 Medscape. Available from : http//www.medscape.com.
4. Nordmann P, Naas T, PoirelL. Global spread of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae. Emerg Infect Dis. 2011;17:1791–8
5. Cohen Stuart J, Leverstein-Van Hall MA; Dutch Working Party on the Detection of Highly Resistant Microorganisms. Guideline for phenotypic screening
and confirmation of carbapenemases in Enterobacteriaceae. Int J Antimicrob Agents. 2010.36:205-10
6. Nordmann P, Poirel L, Dortet L.. Rapid detection of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae. Emerg. Infect. Dis. 2012;18:1503–1507
7. Poirel L, Walsh TR, Cuvillier V, Nordmann P. Multiplex PCR for detection of acquired carbapenemase genes.DiagnMicrobiol Infect Dis. 2011;70: 119-23.
8. Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. M100–S25. Wayne (PA): the Institute; 2015.
9. Keynan S, Hooper NM, Felici A, Amicosante G, Turner AJ. The renal membrane dipeptidase (dehydropeptidase I) inhibitor, cilastatin, inhibits the bacterial metallo-beta-lactamase enzyme CphA. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1995;39(7):1629-1631.
10. Dortet L, Poirel L, Nordmann P. 2012. Rapid detection of carbapenemase-producing Pseudomonas spp. J. Clin. Microbiol.50:3773–3776
11. NataroJP., CA. Bopp, PI. Fields, JB. Kaper, and NA. Strockbine. 2007. Escherichia, Shigella, and Salmonella. In PR. Murray editor. Manual of Clinical Microbiology 9thedn., Washington DC: ASM Press. p.670-687.
12. Queenan AM, Bush K. Carbapenemases: the versatile beta-lactamases. ClinMicrobiol Rev. 2007 Jul;20(3):440-58
13. SchwaberMJ, CarmeliY. Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae: a potential threat.JAMA. 2008;300:2911–3.
14. Tijet N, Boyd D, Patel SN, Mulvey MR, Melano RG. 2013. Evaluation of the Carba NP test for rapid detection of carbapenemaseproducing Enterobacteriaceaeand Pseudomonas aeruginosa. Antimicrob. Agents Chemother. 57:4578–4580.
15. Tijet N, Boyd D, Patel SN, Mulvey MR, Melano RG. 2014. Reply to “Further proofs of concept for the Carba NP test”. Antimicrob. Agents Chemother. 58:1270.
