การพัฒนาชุดการย้อมแบบประหยัดน้ำยาสำหรับไมโครอะเรย์ของชิ้นกล้ามเนื้อ
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
วัตถุประสงค์: การศึกษานี้จัดทำขึ้นเพื่อพัฒนาชุดการย้อมแบบประหยัดน้ำยาสำหรับไมโครอะเรย์ของชิ้นกล้ามเนื้อเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการย้อมชิ้นกล้ามเนื้อในปริมาณมากในคราวเดียวโดยใช้ปริมาณสารเคมีที่ลดลง
วิธีการศึกษา: ออกแบบชุดการย้อมแบบประหยัดน้ำยาสำหรับไมโครอะเรย์ของชิ้นกล้ามเนื้อ โดยใช้แผ่นอะคริลิกขึ้นรูปตามโมเดลที่ได้ออกแบบไว้ จากนั้นเตรียมชิ้นกล้ามเนื้อแบบแถว (Muscle biopsy array) โดยใช้ชิ้นเนื้อวัวสด จำนวน 12 ชิ้น นำมาคงสภาพด้วยวิธี Snap frozen technique แล้วนำมาตัดบาง 8 ไมครอน ลงบนแผ่นสไลด์ด้วยเครื่องควบคุมอุณหภูมิ (cryostat) -20 องศาเซลเซียส จำนวน 18 สไลด์ สไลด์ละ 12 ชิ้นโดยแบ่งสไลด์สำหรับย้อมในภาชนะออกเป็น 2 กลุ่ม คือกลุ่มควบคุมจะย้อมใน Coplin jar ขนาด 50 มิลลิลิตรและกลุ่มทดลองจะย้อมในภาชนะชุดการย้อมแบบประหยัดน้ำยาสำหรับไมโครอะเรย์ของชิ้นกล้ามเนื้อ ขนาด 5 มิลลิลิตร แล้วนำข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์ด้วยสถิติเชิงพรรณนา ได้แก่ ค่าเฉลี่ย ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ค่ามัธยฐาน ร้อยละ และการกระจายของความถี่ สำหรับการเปรียบเทียบคุณภาพการย้อมติดสีระหว่างทั้ง 2 วิธี ใช้ Wilcoxon Signed Rank Test โดยกำหนดระดับนัยสำคัญทางสถิติที่ α = 0.05
ผลการศึกษา: จากการศึกษาพบว่าปริมาณน้ำยาในกลุ่มควบคุมที่ย้อมใน Coplin Jar ใช้ปริมาณน้ำยา 50 มิลลิลิตรต่อหนึ่งวิธีการย้อม จำนวน 9 วิธี คิดเป็น 450 มิลลิลิตร สำหรับกลุ่มทดลองที่ย้อมในชุดการย้อมแบบประหยัดน้ำยาสำหรับไมโครอะเรย์ของชิ้นกล้ามเนื้อ ใช้ปริมาณน้ำยา 5 มิลลิลิตรต่อหนึ่งวิธีการย้อม จำนวน 9 วิธี คิดเป็น 45 มิลลิลิตร ซึ่งแสดงให้เห็นว่าสามารถลดปริมาณน้ำยาเฉลี่ยร้อยละ 90 สำหรับผลการเปรียบเทียบคุณภาพการย้อมติดสีระหว่างกลุ่มควบคุม และกลุ่มทดลอง จากการวิเคราะห์ด้วย Wilcoxon Signed Rank Test พบว่าคุณภาพการย้อมติดสีระหว่างทั้ง 2 วิธีไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p = 0.789)
สรุป: ชุดอุปกรณ์นี้ได้รับการออกแบบโดยคำนึงถึงความสะดวกในการใช้งาน การทำความสะอาด และความสามารถในการนำกลับมาใช้ซ้ำได้ การประดิษฐ์นี้ไม่เพียงแต่ช่วยลดต้นทุนและเพิ่มความคุ้มค่าในการวินิจฉัยแต่ยังช่วยยกระดับมาตรฐานและประสิทธิภาพของกระบวนการในห้องปฏิบัติการพยาธิวิทยาได้อีกด้วย
Article Details
อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
เอกสารอ้างอิง
Kurt YG, Kurt B, Ozcan O, Topal T, Kilic A, Muftuoglu T, et al. Preservative solution for skeletal muscle biopsy samples. Ann Indian Acad Neurol. 2015;18(2):187-93.
Sarnat HB, Carpenter S. Chapter 4 - Muscle Biopsy for Diagnosis of Neuromuscular and Metabolic Diseases. In: Darras BT, Jones HR, Ryan MM, De Vivo DC, editors. Neuromuscular Disorders of Infancy, Childhood, and Adolescence (Second Edition). San Diego: Academic Press; 2015. p. 46-65.
Perlmutter MA, Best CJM, Gillespie JW, Gathright Y, González S, Velasco A, et al. Comparison of Snap Freezing versus Ethanol Fixation for Gene Expression Profiling of Tissue Specimens. The Journal of Molecular Diagnostics. 2004;6(4):371-7.
Spencer LT. 7 - Microtomy for paraffin and frozen sections. In: Suvarna SK, Layton C, Bancroft JD, editors. Bancroft's Theory and Practice of Histological Techniques (Eighth Edition): Elsevier; 2019. p. 84-95.
Maunder-Sewry CA, Dubowitz V. Needle muscle biopsy for carrier detection in Duchenne muscular dystrophy: Part. 1. Light microscopy — Histology, histochemistry and quantitation. Journal of the Neurological Sciences. 1981;49(2):305-24.
Exbrayat JM. Microscopy: Light Microscopy and Histochemical Methods. In: Caballero B, Finglas PM, Toldrá F, editors. Encyclopedia of Food and Health. Oxford: Academic Press; 2016. p. 715-23.
Steinke H, Wiersbicki D, Speckert M-L, Merkwitz C, Wolfskämpf T, Wolf B. Periodic acid-Schiff (PAS) reaction and plastination in whole body slices. A novel technique to identify fascial tissue structures. Annals of Anatomy - Anatomischer Anzeiger. 2018;216:29-35.
Wijayaweera CJ, de S Amaratunga A, Angunawela P. Histopathology of Cleft Lip Muscle: an Enzyme Histochemical and Electron Microscopic Study. Asian Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 2002;14(4):219-25.
Old SL, Johnson MA. Methods of microphotometric assay of succinate dehydrogenase and cytochromec oxidase activities for use on human skeletal muscle. The Histochemical Journal. 1989;21(9):545-55.
Wank V, Bauer R, Punkt K, Ziegan J. Enzyme activity patterns of myosin ATPase, α-glycerophosphate dehydrogenase and succinate dehydrogenase within different muscle fibre types. Acta Histochemica. 1994;96(2):213-8.
Xiang L, Rong J-F, Xin C, Li X-Y, Zheng Y, Ren P-R, et al. Reducing Target Volumes of Intensity Modulated Radiation Therapy After Induction Chemotherapy in Locoregionally Advanced Nasopharyngeal Carcinoma: Long-Term Results of a Prospective, Multicenter, Randomized Trial. Int J Radiation Oncology Biology Physics. 2023;117(4):914-24.
Perrucci M, Ricci EM, Locatelli M, Ali I, Mansour FR, Kabir A, et al. Recent trends in microsampling and reduced-volume sample preparation procedures. Advances in Sample Preparation. 2025;14:100182.
Tot T. Cost-benefit analysis of using large-format histology sections in routine diagnostic breast care. The Breast. 2010;19(4):284-8.
