การจัดเตรียมแอนติบอดีมาตรฐานอ้างอิงต่อเชื้อ SARS-CoV-2 ชนิดทําแห้งแบบแช่เยือกแข็ง
แอนติบอดีมาตรฐานอ้างอิงต่อเชื้อ SARS-CoV-2 ชนิดทำแห้งแบบแช่เยือกแข็ง
คำสำคัญ:
แอนติบอดีมาตรฐานอ้างอิงต่อ SARS-CoV-2, PRNT, การทําแห้งแบบแช่เยือกแข็งบทคัดย่อ
วัคซีนที่มีคุณภาพได้มาตรฐานเป็นเครื่องมือหลักในการแก้ปัญหาการระบาดใหญ่ของโรคโควิด 19 ข้อมูลการควบคุมคุณภาพวัคซีนและการทดสอบแอนติบอดีลบล้างไวรัส (neutralizing antibody) ต่อไวรัส SARS-CoV-2 สายพันธุ์ต่าง ๆ เป็นประโยชน์ในการกําหนดรูปแบบการให้วัคซีน เพื่อการควบคุมคุณภาพของวัคซีนและการตรวจระดับแอนติบอดีภายหลังได้รับวัคซีน แม้องค์การอนามัยโลกจะมีการผลิตสารมาตรฐานระดับสากลแต่มีปริมาณจํากัดไม่เพียงพอต่อความต้องการ ดังนั้นการศึกษาครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อจัดเตรียมและกําหนดค่าแอนติบอดีมาตรฐานต่อเชื้อ SARS-CoV-2 สําหรับใช้ในการทดสอบโดยวิธี Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) ซึ่งเป็นวิธีมาตรฐานสําหรับการตรวจหาระดับแอนติบอดีต่อเชื้อ SARS-CoV-2 แต่ละสายพันธุ์ คณะผู้วิจัยได้จัดเตรียมแอนติบอดีจากซีรัมผู้ป่วยและผู้ได้รับวัคซีนในรูปผงแห้งแช่เยือกแข็ง เปรียบเทียบกับโมโนโคลนอลแอนติบอดี (mAbs) โดยได้จัดเตรียมสูตรและศึกษาสภาวะการทําแห้งแบบแช่เยือกแข็งที่เหมาะสม ในการประเมินคุณภาพของแอนติบอดีที่ผ่านการทําแห้งแบบแช่เยือกแข็ง พบว่าความเป็นเนื้อเดียวกันของแอนติบอดีชนิด mAbs ไม่เป็นไปตามเกณฑ์ยอมรับ ในขณะที่แอนติบอดีจากซีรัมมีคุณสมบัติทางกายภาพและชีววิทยาอยู่ในเกณฑ์ยอมรับ สามารถนํามาใช้เป็นแอนติบอดีมาตรฐานอ้างอิงต่อเชื้อ SARS-CoV-2 ในรูปผงแห้ง โดยพบว่ามีค่า Neutralizing antibody ต่อสายพันธุ์เดลตา โอไมครอน BA.2 และโอไมครอน BA.5 ที่ทดสอบโดยวิธี PRNT50 titer (ช่วงความเชื่อมั่น 95%) เท่ากับ 512.97 (473–556), 288.14 (265–313) และ 161.49 (124–184) ตามลําดับ สําหรับการประเมินความคงตัว โดยการประเมินความแรงของผลิตภัณฑ์ที่ใช้งานจริงภายหลังการผลิต พบว่าอยู่ในเกณฑ์การยอมรับ (ค่าเฉลี่ยเรขาคณิต ±3 SD) ดังนั้นแอนติบอดีจากซีรัมจึงเหมาะสมสําหรับใช้เป็นแอนติบอดีมาตรฐานอ้างอิงต่อไวรัส SARS-CoV-2 เพื่อควบคุมคุณภาพวัคซีน และประเมินระดับแอนติบอดีลบล้างไวรัสหลังการฉีดวัคซีนในช่วงการระบาดของโรคโควิด 19
เอกสารอ้างอิง
Rey L, May JC. Freeze-drying/lyophilization of pharmaceutical and biological products. 2nd ed. New York: Marcel Dekker; 2004.
Naddafi K, Moosavi GH, Mesdaghinia AR. Evaluation of lyophilization effects on operational parameters and characteristics of activated sludge. Iranian J Env Health Sci Eng 2004; 1(1): 20-5.
Matejtschuk P, Perrie Y, Gurney R. Freeze-drying microscopy-unravelling the complexities of freeze-drying pharmaceuticals with advanced microscopy techniques. Drug Dev Deliv. [online]. 2022; [cited 2024 Oct 25]; [5 screens]. Available from: URL: https://drug-dev.com/freezedrying-microscopy-unravelling-the-complexities-of-freeze-drying-pharmaceuticalswith-advanced-microscopy-techniques-2.
Barresi AA, Ghio S, Fissore D, Pisano R. Freeze-drying of pharmaceutical excipients close to collapse temperature: influence of the process conditions on process time and product quality. Dry Technol 2009; 27(6): 805-16.
Haeusera C, Goldbach P, Huwyler J, Friess W, Allmendinger A. Impact of dextran on thermal properties, product quality attributes, and monoclonal antibody stability in freeze-dried formulations. Eur J Pharm Biopharm 2020; 147: 45-56.
Cheng SS, Mok CK, Li JK, Ng SS, Lam BH, Jeevan T, et al. Plaque-neutralizing antibody to BA.2.12.1, BA.4 and BA.5 in individuals with three doses of BioNTech or CoronaVac vaccines, natural infection and breakthrough infection. J Clin Virol 2022; 156: 105273. (7 pages).
Bewley KR, Coombes NS, Gagnon L, McInroy L, Baker N, Shaik I, et al. Quantification of SARS-CoV-2 neutralizing antibody by wild-type plaque reduction neutralization, microneutralization and pseudotyped virus neutralization assays. Nat Protoc 2021; 16: 3114-40.
WHO International Standard. First WHO international standard for anti-SARS-CoV-2 immunoglobulin (human) NIBSC code: 20/136. Instructions for use. [online]. 2020; [cited 2024 Oct 25]; [2 screens]. Available from: URL: https://nibsc.org/documents/ifu/20-136.pdf.
WHO/BS/2020.2403. Establishment of the WHO international standard and reference panel for anti-SARS-CoV-2 antibody. [online]. 2020; [cited 2024 Oct 25]; [60 screens]. Available from: URL: https://www.who.int/publications/m/item/WHO-BS-2020.2403.
The United States Pharmacopeia. General chapters <921> water determination. In: USP-NF. Rockville, MD: United States Pharmacopeia; 2022. page 815-819.
ISO 13528:2022. Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparison. 3rd ed. Geneva, Switzerland: International Organization for Standardization; 2022.
ISO 33405:2024. Reference materials-approaches for characterization and assessment of homogeneity and stability. Switzerland: International Organization for Standardization; 2024.
Kullabut K, Yusho A, Sapsutthipas S, Chumpol S, Ritthitham K, Phumiamorn S. Method validation of the plaque assay for SARS-CoV-2 Titration. Thai Food Drug J 2021; 28(3): 9-16.
Srisutthisamphan K, Saenboonrueng J, Wanitchang A, Viriyakitkosol R, Jongkaewwattana A. Cross-neutralization of SARSCoV-2-specific antibodies in convalescent and immunized human sera against the bat and pangolin coronaviruses. Viruses 2022; 14: 1793. (13 pages).
Okba NMA, Müller MA, Li W, Wang C, Geurts van Kessel CH, Corman VM, et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2-specific antibody responses in coronavirus disease patients. Emerg Infect Dis 2020; 26(7): 1478-88.
Jamtsho R. Stability of lyophilized human serum for use as quality control material in bhutan. Indian J Clin Biochem 2013; 28(4): 418-21.
Kida H, Yamasaki Y, Feril LB Jr, Endo H, Itaka K, Tachibana K. Efficient mRNA delivery with lyophilized human serum albumin-based nanobubbles. Nanomaterials (Basel) 2023; 13(7): 1283. (18 pages).
Kamath S, Lip GY. Fibrinogen: biochemistry, epidemiology and determinants. QJM: An International Journal of Medicine. 2003; 96(10): 711-29.
Santa Maria F, Huang YS, Vanlandingham DL, Bringmann P. Inactivation of SARS-CoV-2 in all blood components using Amotosalen/ultraviolet a light and Amustaline/glutathione pathogen reduction technologies. Pathogens 2022; 11(5): 521. (13 pages).
Zäh M, Brandenbusch C, Groël S, Winter G, Sadowski G Water activity as an indicator for antibody storage stability in lyophilized formulations. Mol Pharm 2025; 22(2): 918-26.
WHO/BS/2022.2427. Establishment of the 2nd WHO international standard for anti-SARSCoV-2 immunoglobulin and reference panel for antibodies to SARS-CoV-2 variants of concern. [online]. 2022; [cited 2024 Oct 25]; [67 screens]. Available from: URL: https://www.who.int/publications/m/item/who-bs-2022.2427.
World Health Organization. Annex 2: WHO manual for the preparation of reference materials for use as secondary standards in antibody testing. In: WHO expert committee on biological standardization: seventy-fifth report. WHO Technical Report Series No. 1043. Geneva: World Health Organization; 2022. p. 41-129.
ดาวน์โหลด
เผยแพร่แล้ว
รูปแบบการอ้างอิง
ฉบับ
ประเภทบทความ
สัญญาอนุญาต
ลิขสิทธิ์ (c) 2025 วารสารกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์
อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
