การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณ Alliin ในกระเทียม โดยวิธี Ultra Performance Liquid Chromatography

การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณ alliin ในกระเทียม โดยวิธี UPLC

บทคัดย่อ

        Alliin เป็นสารสำคัญหลักที่พบในกระเทียม (Allium sativum L.) มีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรีย ต้านอักเสบ และช่วยลดภาวะความดันโลหิตสูง ดังนั้นการวิเคราะห์ปริมาณ alliin ในกระเทียมจึงสามารถนำมาใช้ในการประเมินคุณภาพของกระเทียม การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณ alliin ในกระเทียม โดยวิธี Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) โดยชั่งตัวอย่างกระเทียม 150 มิลลิกรัม เติม 50% methanol ปริมาตร 25 มิลลิลิตร สกัดโดยการผสมแบบ vortex เป็นเวลา 1 นาที ดูดส่วนใสเหนือตะกอนมากรองผ่าน syringe filter ชนิด PTFE ฉีดสารละลายตัวอย่างที่ได้ ปริมาตร 1 ไมโครลิตร เข้าสู่ระบบโครมาโทกราฟ ประกอบด้วย คอลัมน์ Acquity^TM BEH^® Amide 2.1 × 100 มิลลิเมตร, 1.7 ไมโครเมตร วัฏภาคเคลื่อนที่ คือ ส่วนผสมของ acetonitrile และน้ำ โดยระยะแยกอยู่ในช่วงเวลา 0.00–2.30 นาที เริ่มต้นที่อัตราส่วน 85:15 นาน 0.65 นาที จากนั้นปรับเป็น 75:25 และ 86:14 ภายในเวลา 1.42 นาที และ 1.52 นาที ตามลำดับ และคงที่ที่อัตราส่วน 86:14 จนถึงนาทีที่ 2.30 ด้วยอัตราการไหล 0.55 มิลลิลิตรต่อนาที อุณหภูมิคอลัมน์ เท่ากับ 40 องศาเซลเซียส ตรวจวัดสารด้วยตัวตรวจวัดชนิด Photodiode Array (PDA) ที่ความยาวคลื่น 220 นาโนเมตร ค่า retention time ของ alliin เท่ากับ 2.02 นาที และเมื่อทำการทดสอบความใช้ได้ของวิธี พบว่ากราฟมาตรฐานของ alliin มีความเป็นเส้นตรงในช่วง 0.049–0.582 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มีค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจ (R²) เท่ากับ 0.999791 ค่าความแม่นอยู่ในช่วงร้อยละ 98.64–106.02 ค่าความเที่ยงอยู่ในช่วงร้อยละ 0.51–1.19 มีค่าขีดจำกัดของการตรวจพบและขีดจำกัดของการหาปริมาณ เท่ากับ 0.006 และ 0.033 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลำดับ เมื่อศึกษาปริมาณ alliin ในกระเทียม จำนวน 8 ตัวอย่าง พบว่ามีค่าเฉลี่ย เท่ากับ 9.87±2.75 มิลลิกรัมต่อกรัม การศึกษานี้สามารถนำไปใช้ในการวิเคราะห์ปริมาณ alliin ในกระเทียมเพื่อใช้ในการควบคุมคุณภาพ รวมถึงใช้ในการคัดเลือกกระเทียมที่มีคุณภาพเพื่อเข้าสู่กระบวนการผลิตยาหรือผลิตภัณฑ์สุขภาพต่อไป