Method Validation of Rebaudioside A and Stevioside Determination in Syrup by High Performance Liquid Chromatography
Determination of Rebaudioside A and Stevioside in Syrup by HPLC
Keywords:
Rebaudioside A, Stevioside, Syrup, HPLCAbstract
Rebaudioside A and stevioside are steviol glycosides extracted from Stevia rebaudiana Bertoni. According to the Notification of Ministry of Public Health No. 418 (B.E. 2020), both are allowed to use as sweetener. The objective of this study was to develop the suitable method to analyze rebaudioside A and stevioside in syrup using HPLC. The condition consisted of Capcell pak C18 MG II column as solid phase, ultraviolet detector at wavelength 210 nm and the mixture of acetonitrile and 10 mM potassium hydrogen phosphate pH 2.6 (32:68) as mobile phase. The results showed that limit of detection (LOD) at 2.0 mg/kg, limit of quantitation (LOQ) at 4.0 mg/kg, linearity and range were detected from 2.0 to 100 μg/ml (R2 = 1). The %recovery of the concentration at 4.0, 28 and 140 mg/kg, of rebaudioside A and stevioside 96.5-106.9% and 96.0-109.8% respectively. Precision of rebaudioside A and stevioside were acceptable (HORRAT < 2). Intermediate precision calculated from analytical results of quality control samples of rebaudioside A and stevioside were equal to 0.36 and 0.45, respectively. In conclusion, this method is suitable for analyze rebaudioside A and stevioside in syrup in the laboratory.
References
เมดไทย (Medthai). หญ้าหวาน สรรพคุณและประโยชน์ของหญ้าหวาน 14 ข้อ. [ออนไลน์]. 2563; [สืบค้น 4 เม.ย. 2565]; [4 หน้า]. เข้าถึงได้ที่ : URL: https://medthai.com/หญ้าหวาน/.
EFSA J 2010; Panel on Food Additives and Nutrient Sources added to Food (ANS). Scientific opinion on the safety of steviol glycosides for the proposed uses as a food additive. EFSA Journal 2010; 8(4): 1537. (84 pages).
Carakostas MC, Curry LL, Boileau AC, Brusick DJ. Overview: the history, technical function and safety of rebaudioside A, a naturally occurring steviol glycoside, for use in food and beverages. Food Chem Toxicol 2008; 46(Suppl 7) : S1-10.
Food and Agricultural Organization of the United Nations. Steviol glycosides-69th JECFAChemical and Technical Assessment (CTA). [online]. 2008; [cited 2022 Apr 4]; [7 screens]. Available from: URL: https://www.fao.org/3/at966e/at966e.pdf.
Food and Agricultural Organization of the United Nations. Steviol glycosides-82nd JECFA-Chemical and Technical Assessment (CTA). [online]. 2016; [cited 2022 Apr 4]; [10 screens]. Available from: URL: https://www.fao.org/3/br566e/br566e.pdf.
พระราชบัญญัติอาหาร พ.ศ. 2522. ประกาศกระทรวงสาธารณสุข ฉบับที่ 418 (พ.ศ. 2563) เรื่อง กำหนดหลักเกณฑ์ เงื่อนไข วิธีการใช้ และอัตราส่วนของวัตถุเจือปนอาหาร (ฉบับที่ 2). ราชกิจจานุเบกษา เล่ม 137 ตอนพิเศษ 237 ง (วันที่ 9 ตุลาคม 2563).
ประกาศสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยา เรื่อง คำชี้แจงประกาศกระทรวงสาธารณสุข (ฉบับที่ 418) พ.ศ. 2563 ออกตามความในพระราชบัญญัติอาหาร พ.ศ. 2522 เรื่อง กำหนดหลักเกณฑ์ เงื่อนไข วิธีการใช้และอัตราส่วนของวัตถุเจือปนอาหาร (ฉบับที่ 2). [ออนไลน์]. 2563; [สืบค้น 4 เม.ย. 2565]; [210 หน้า]. เข้าถึงได้ที่: URL: http://food.fda.moph.go.th/law/data/announ_fda/418_FoodAdditives.pdf.
Kitada Y, Sasaki M, Yamazoe Y, Nakazawa H. Simultaneous determination of stevioside, rebaudioside A and C and dulcoside A in food by high-performance liquid chromatography. J Chromatogr 1989; 474: 447-51.
73rd meeting of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA). Steviol glycosides. Rome: FAO/JECFA Monograph; 2010.
ทิพวรรณ นิ่งน้อย. แนวปฏิบัติการทดสอบความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ทางเคมีโดยห้องปฏิบัติการเดียว. นนทบุรี: กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ กระทรวงสาธารณสุข; 2549.
สุวรรณา จารุนุช, และคณะ. แนวปฏิบัติการประมาณค่าความไม่แน่นอนของการวัดทางเคมี. นนทบุรี: กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ กระทรวงสาธารณสุข; 2550.
Eurachem Guide. The Fitness for purpose of analytical methods: a laboratory guide to method validation and related topics. 2nd ed. [online]. 2014; [cited 2022 Jan 1]; [70 screens]. Available from: URL: https://www.eurachem.org/images/stories/Guides/pdf/MV_guide_2nd_ed_EN.pdf.
Fayaz S, Sharma R, Rajput YS, Mann B, Lata K. Estimation of steviol glycosides in food matrices by high performance liquid chromatography. J Food Sci Technol. 2018; 55(8): 3325-34.
Downloads
Published
How to Cite
Issue
Section
License
Copyright (c) 2023 BULLETIN OF THE DEPARTMENT OF MEDICAL SCIENCES
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
